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二氢神经鞘氨醇elisa试剂盒
  • 品牌:化邦
  • 产地:上海
  • 型号:96t/48t
  • 货号:HB-Y65447J
  • 价格: ¥2450/盒
  • 发布日期: 2023-06-06
  • 更新日期: 2024-02-28
产品详请
产地 上海
保存条件 2-9°C
品牌 化邦
货号 HB-Y65447J
检测方法 酶联免疫法
保质期 6个月
规格 96t/48t
适应物种 人,大鼠,小鼠,兔子,植物,鱼等
数量 55
用途范围 用于科研实验
样本 血清组织等
应用 用于科研实验
是否进口

二氢神经鞘氨醇(Sa)酶联免疫分析(ELISA

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

使用目的:

本试剂盒用于测定样本中二氢神经鞘氨醇(Sa)的含量。

实验原理

本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本二氢神经鞘氨醇(Sa)水平。用纯化的二氢神经鞘氨醇(Sa)抗体包被微孔板,制成固相体,往包被单抗的微孔中加入二氢神经鞘氨醇(Sa),和HRP标记的二氢神经鞘氨醇(Sa)抗原,使它们竞争结合,经过 洗涤后底物TMB显色。样本颜色的深浅和样品中的二氢神经鞘氨醇(Sa)的含量相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品二氢神经鞘氨醇(Sa)的含量。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml×1

8

标准品S1400ng/L

0.5ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

标准品S2200ng/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12×8

标准品S3100ng/L

0.5ml×1

4

显色剂A

6ml×1

标准品S450ng/L

0.5ml×1

5

显色剂B

6ml×1

标准品S525ng/L

0.5ml×1

6

终止液

6ml×1/

9

说明书

1

7

样品稀释液

6ml×1/

10

封板膜

2

标本要求

1.标本处理:(1)水样   采集后经 -20℃反复冻融三次,再经玻璃纤维过滤后,备查

2)组织 样品用丁醇:甲醇:水(52570 V:V:V)抽提,或按相关文献提取进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,备查

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 加样:分别设标准孔、空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

2. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

7. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

8. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线, 做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔 孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请 乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

检测范围:

10ng/L -450ng/L

规格:

96/

保存条件及有效期

1试剂盒保存:2-8

2.有效期:6个月